Nanodrop One 超微量分光光度计操作规程

1. 将仪器的电源线插好，打开电源开关，等待仪器软件初始化，出现主界面。

2. 选择检测方法：例如 dsDNA 定量，选择"Nucleic Acid"，选择该菜单下的dsDNA功能。

3. 测试前先进行基座清洁：2μl 蒸馏水加到检测基座上，放下样品臂，浸泡 2-3 分钟，用无尘纸将检测基座擦拭干净。

4. 调零：清洁基座后，在下探头上加 2μl 蒸馏水（请使用与样品对应的溶液，例如使用 Elution Buffer 溶解DNA，则使用 Elution Buffer 进行调零），放下探头（如果"Blank"右侧为"ON"，则自动调零，如是"OFF"，需要手动点击"Blank"按键），仪器以蒸馏水为空白对照，进行调零。

5. 用滤纸吸去蒸馏水，加2μl DNA 样品，放下上探头（如果"Measure"右侧为"ON"：，则自动测量，如是"OFF"，需手动点击"Measure"按键），仪器开始定量检测。

7. 测量结束后，屏幕左侧显示扫描峰图，右上角列表显示检测值：浓度，A260/A280， A260/A230。向左滑动屏幕可以查看详细数据：浓度，A260/A280，A260/A230 以及 260、280nm 的检测值。当数据前出现蓝色i 图标时，点击图标可显示相关注意事项；出现 

时，指示数据可以进行污染物分析，可从Data Viewer 进行查看。

8. 将 DNA 样品用滤纸吸去，加第二个 DNA 样品，放下上探头，继续测量下一个样品。

9. 换用其他空白对照时，吸去样品，清洁基座，加新的空白对照溶液（如缓冲液）重复步骤 5－8，进行测量。

10. 实验完成，点击屏幕右下角End Experiment。如需导出数据，则先插入 USB drive，点击Export，选择需要导出的数据信息，点击Export，传输完成，弹出Export Success对话框，点"OK "完成。再点击End Experiment退出主界面，按照提示，完成清洁工作。

11. 测量结束后，吸去样品，加 2μl 蒸馏水，放下上探头，清洁仪器表面。吸去蒸馏水，放下上探头。选择左上角菜单键弹出菜单，选择 home 回到主页。

12. 测量蛋白时，选Protein 菜单，继续选择 Protein A280（蛋白定量）；测量细胞液或菌液时，选择 OD600（细胞培养）。操作步骤与核酸定量相似。

13. 测蛋白 A280 ，注意选择样品类型，如：测BSA 蛋白样品，在"Proteins"界面点Protein A280，然后点击Select Type，下拉菜单选“BSA”，再点确认进入测量界面。

14. 如需导出多个结果或翻看测量结果，可在主页点击按键，弹出实验记录，点屏幕右上角Select，选需导出数据，然后点Done 完成导出。 定量

 注意事项：

1、 样品在测量之前，请务必低速离心使样品混合均匀，否则影响测量准确性。

2、 加样量一般为 2μl，但当样品较粘稠时，2μl 比较难加，可适当提高样品量。但样品不可过量，需保证样品不向加样表面两边流下。

3、测量时不要重复点“Measure”，如需重复测量，请先擦去样品，重新再加相同的样品进行测量。

4、注意仪器放置环境，防潮、防霉、避免强光直射。

5、测量结束后，加 2μl 蒸馏水，放下上探头，浸泡 30s，然后清洁上下探头。